Индивидуальное и комбинированное действие биологически активных соединений на биолюминесценцию культуры светящихся бактерий P. leiognathi Sh1

С целью выявления закономерностей проявления совместного влияния комбинации ароматических соединений на in vitro уровне на пролиферирующие клетки, был использован биолюминесцентный тест на основе морских светящихся бактерий, подробно изложенный в подразделе 2.5.

Подобные тест-обьекты реагируют изменением интенсивности свечения на любые колебания метаболизма, поэтому многие вещества с различными механизмами действия могут быть оценены с использованием такого метода. По данным [10], как ингибирование биолюминесценции, так и ее активирование более чем на 50%, связано с проявлением токсичности. Этот принцип широко описан в литературе и используется для оценки экотоксичности водных сред. С другой стороны биолюминесцентный метод основан на точном измерении физического сигнала - интенсивности излучаемого света, что приближает его к более точным физико-химическим методам. В качестве действующих веществ в работе использовались комбинации CAF с ДНК-связывающимися ароматическими мутагенами: PF и EB.

5.5.1. Индивидуальное действие биологически активных соединений на биолюминесценцию культуры светящихся бактерий P. leiognathi Sh1

Раздельное исследование действия мутагенных веществ на биолюминесценцию светящихся бактерий показало, что при концентрации до 0.1 мг/мл (PF - 0.4 ммоль/л; EB - 0.25 ммоль/л), а для кофеина - до 1 мг/мл (5.2 ммоль/л) и времени контакта с бактериями до 60 мин, все вещества действуют аналогичным образом, ингибируя бактериальную биолюминесценцию. Для EB отмечалось некоторое возрастание свечения при концентрациях до 0.05 ммоль/л (см. рис. 5.10-5.12).

Рисунок 5.10. Острое и хроническое действие PF на биолюминесценцию P. leiognathi Sh1






Оценка хронического действия веществ выявила их разнонаправленный характер: CAF и EB приводили к значительному возрастанию интенсивности бактериального свечения, PF - к полному её тушению (рис. 5.10-5.12). При этом биологический эффект проявлялся при более низких концентрациях, чем острое действие. Дальнейшее снижение концентрации веществ и определение их эффективных значений, при которых происходило увеличение или снижение биолюминесцентного сигнала в 2 раза (ЭК50), показало, что для EB и PF они равны 0.002 и 0.008 ммоль/л соответственно.

Как показано в работе [37], разнонаправленный характер влияния мутагенных веществ на светящиеся бактерии связан с двумя процессами. Повышение люминесценции является результатом взаимодействия с нуклеиновыми кислотами и мутагенного действия, в то время как, ингибирование свечения определяется токсичностью. Для одного и того же штамма светящихся бактерий при низких концентрациях веществ-мутагенов PF и EB наблюдалась стимуляция биолюминесценции, а при более высоких - ее снижение. При этом кофеин, даже при концентрациях на порядок выше остальных веществ, проявлял только мутагенные свойства, но не токсические. Полученные результаты указывают на то, что наблюдаемая в данной работе реакция бактериальной культуры на ароматические мутагены в виде изменения биолюминесценции является результатом совместного действия токсического и мутагенного эффектов, причем при близких значениях молярных концентраций PF проявляет токсические свойства в тесте на хроническое действие, а EB - мутагенные. Это совпадает с данными [170], а также с тем, что PF используется в качестве бактериостатического лекарственного средства. Отметим, что по данным разных авторов (см. [44, 45] и ссылки в них) равновесная константа комплексообразования EB с нативной ДНК в несколько раз превышает константу для PF, что в целом косвенно подтверждает роль ДНК в интерпретации механизма обнаруженной разнонаправленности в клеточной линии светящихся бактерий.

5.5.1.

<< | >>
Источник: Скамрова Г алина Борисовна. КОМБИНИРОВАННОЕ ДЕЙСТВИЕ СЛАБОГО МИКРОВОЛНОВОГО ИЗЛУЧЕНИЯ И ДНК-СВЯЗЫВАЮЩИХСЯ ПРЕПАРАТОВ НА КЛЕТКИ БУККАЛЬНОГО ЭПИТЕЛИЯ ЧЕЛОВЕКА. 2014

Еще по теме Индивидуальное и комбинированное действие биологически активных соединений на биолюминесценцию культуры светящихся бактерий P. leiognathi Sh1:

  1. Комбинированное действие вредных веществ
  2. Комбинированное действие вредных факторов
  3. Скамрова Г алина Борисовна. КОМБИНИРОВАННОЕ ДЕЙСТВИЕ СЛАБОГО МИКРОВОЛНОВОГО ИЗЛУЧЕНИЯ И ДНК-СВЯЗЫВАЮЩИХСЯ ПРЕПАРАТОВ НА КЛЕТКИ БУККАЛЬНОГО ЭПИТЕЛИЯ ЧЕЛОВЕКА, 2014
  4. ЧЕРНЫШЕВА ЕЛЕНА ВЛАДИСЛАВОВНА. ВЛИЯНИЕ ДРЕВНЕГО АНТРОПОГЕННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА БИОЛОГИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ПОЧВ КИСЛОВОДСКОЙ КОТЛОВИНЫ, 2015
  5. §14.6. Пример построения профиля психологической активности личности по основным характеристикам ее индивидуальности
  6. Глава 14. Методики исследования индивидуальных свойств личности по параметру активности
  7. Глава 11. Активность и реактивность личности как основа причинных типологий индивидуальных различий
  8. Биологическое действие звуков и шумов
  9. Педагогика индивидуального действия
  10. АКТИВНОСТЬ И КУЛЬТУРА